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一种治疗病毒性感冒的地衣提取物的制作方法

  [0001] 本发明涉及中药提取物领域,具体涉及一种地衣提取物及含有该提取物的药物制 剂,该提取物可以应用于治疗病毒性感冒。

  [0002] 地衣是低等植物的重要类群,为菌藻共生体。其中的共生菌以子囊菌为主,少数为 担子菌,共生藻为蓝藻或绿藻。由于地衣的生物学特性主要是菌藻共生体中真菌的体现,故 又称为地衣型真菌。地衣被认为是生物互惠共生现象中最完善的典型。全世界已知地衣500 多个属,26000多个种,我国有232属1766种。地衣入药在我国具有悠久的历史,《诗经》中 就有关于松萝药用的记载。据各种本草及有关资料记载,约有200种地衣入药。

  [0003] 地衣是真菌和藻类高度结合的共生复合体,由于地衣共生的特殊性,其含有的初 生代谢产物(多糖类)和次生代谢产物(酚酸类)构成了天然有机化合物独特的类群。近 几年从地衣植物中分离得到了许多具有活性的新化合物,包括:地衣多糖、地衣酸(缩酚酸 类、缩酚酸环醚类、缩酚酮类和二苯并呋喃类)和醌类等其他成分。

  [0004] 本发明的目的在于提供一种地衣提取物,其制备方法和液相分析方法,含有该提 取物的药物制剂及利用该提取物制备治疗病毒性感冒的药物的用途。

  [0007] (a)以重量计,每100份药材包含干燥的地衣80~90份和干燥的车前草10~20 份,混合粉碎,用55 %乙醇溶液热回流提取,合并提取液,浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩 液;(b)将步骤(a)所得乙醇提取浓缩液用水稀释,依次用石油醚、乙酸乙酯和水饱和的正 丁醇萃取,减压浓缩,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物;(c)正丁 醇萃取物用水溶解,过滤,用大孔树脂富集活性成分,先用10%乙醇冲洗8个柱体积除去大 极性成分,再用70%乙醇洗脱12个柱体积,收集70%洗脱液,减压浓缩即得。

  [0008] 为了能够通过建立HPLC指纹图谱的方法控制不同批次制备的提取物的批间差 异,所述提取物的液相分析方法为:

  [0013] 药物制剂,含有治疗有效量的所述提取物和药学上可接受的载体。

  [0016] 本发明提取物用作药物时,可以直接使用,或者以药物制剂的形式使用。

  [0017] 所述药物制剂含有治疗有效量的本发明地衣提取物,其余为药物学上可接受的、 对人和动物无毒和惰性的可药用载体和/或赋形剂。

  [0018] 所述的可药用载体或赋形剂是一种或多种选自固体、半固体和液体稀释剂、填料 以及药物制品辅剂。将本发明的药物制剂以单位体重服用量的形式使用。本发明提取物可 通过口服或注射的形式施用于需要治疗的患者。用于口服时,可将其制成片剂、缓释片、控 释片、胶囊、滴丸、微丸、混悬剂、乳剂、散剂或颗粒剂、口服液等;用于注射时,可制成灭菌的 水性或油性溶液、无菌粉针、脂质体或乳剂等。

  [0019] 本发明的优点:本发明通过对干燥的地衣根茎进行提取、除杂、富集处理,能得到 具有治疗病毒性感冒的提取物;本发明提供的液相分析方法可以用于建立该提取物的指纹 图谱,用于控制不同批次制备的提取物的批间差异。

  [0021] 下面结合实施例进一步说明本发明的实质性内容,但并不以此限定本发明保护范 围。尽管参照较佳实施例对本发明作了详细说明,本领域的普通技术人员应当理解,可以对 本发明的技术方案进行修改或者等同替换,而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

  [0024] 主要试剂:食品级乙醇购自上海凌峰化学试剂有限公司;医药级AB-8大孔树脂购 自天津波鸿树脂有限公司;乙腈为HPLC级,购于TEDIA ;85 %磷酸为HPLC级,购于TEDIA ; 色谱用纯净水为哇哈哈纯净水。

  [0025] 制备方法:将8. 5kg干燥地衣根茎和I. 5kg干燥车前草混合粉碎,用55 %乙醇溶 液热回流提取(25LX3次),合并提取液,浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液(2L);将所得 乙醇提取浓缩液用水稀释至3L,依次用石油醚(3LX3次)、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和 的正丁醇(3LX3次)萃取,减压浓缩,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解,医用脱脂棉过滤,用AB-8大孔树脂(2kg,柱体 积1.5L)富集活性成分,先用10%乙醇冲洗8个柱体积(12L)除去大极性成分,再用70% 乙醇洗脱12个柱体积(18L),收集70 %洗脱液,减压浓缩,即得地衣提取物约150g。

  [0027] 制备方法:将8. Okg干燥地衣根茎和2. Okg干燥车前草混合粉碎,用55 %乙醇溶 液热回流提取(25LX3次),合并提取液,浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液(2L);将所得 乙醇提取浓缩液用水稀释至3L,依次用石油醚(3LX3次)、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和 的正丁醇(3LX3次)萃取,减压浓缩,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解,医用脱脂棉过滤,用AB-8大孔树脂(2kg,柱体 积1.5L)富集活性成分,先用10%乙醇冲洗8个柱体积(12L)除去大极性成分,再用70% 乙醇洗脱12个柱体积(18L),收集70 %洗脱液,减压浓缩,即得地衣提取物约150g。

  [0029] 制备方法:将9. Okg干燥地衣根茎和1.0 kg干燥车前草混合粉碎,用55 %乙醇溶 液热回流提取(25LX3次),合并提取液,浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液(2L);将所得 乙醇提取浓缩液用水稀释至3L,依次用石油醚(3LX3次)、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和 的正丁醇(3LX3次)萃取,减压浓缩,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解,医用脱脂棉过滤,用AB-8大孔树脂(2kg,柱体 积1.5L)富集活性成分,先用10%乙醇冲洗8个柱体积(12L)除去大极性成分,再用70% 乙醇洗脱12个柱体积(18L),收集70 %洗脱液,减压浓缩,即得地衣提取物约150g。

  [0031] 制备方法:将7. 5kg干燥地衣根茎和2. 5kg干燥车前草混合粉碎,用55%乙醇溶 液热回流提取(25LX3次),合并提取液,浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液(2L);将所得 乙醇提取浓缩液用水稀释至3L,依次用石油醚(3LX3次)、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和 的正丁醇(3LX3次)萃取,减压浓缩,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解,医用脱脂棉过滤,用AB-8大孔树脂(2kg,柱体 积1.5L)富集活性成分,先用10%乙醇冲洗8个柱体积(12L)除去大极性成分,再用70% 乙醇洗脱12个柱体积(18L),收集70 %洗脱液,减压浓缩,即得地衣提取物约150g。

  [0033] 制备方法:将9. 5kg干燥地衣根茎和0. 5kg干燥车前草混合粉碎,用55 %乙醇溶 液热回流提取(25LX3次),合并提取液,浓缩至无醇味得到乙醇提取浓缩液(2L);将所得 乙醇提取浓缩液用水稀释至3L,依次用石油醚(3LX3次)、乙酸乙酯(3LX3次)和水饱和 的正丁醇(3LX3次)萃取,减压浓缩,分别得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃 取物232g ; (c)正丁醇萃取物用I. 5L水溶解,医用脱脂棉过滤,用AB-8大孔树脂(2kg,柱体 积1.5L)富集活性成分,先用10%乙醇冲洗8个柱体积(12L)除去大极性成分,再用70% 乙醇洗脱12个柱体积(18L),收集70 %洗脱液,减压浓缩,即得地衣提取物约150g。

  [0035] 供试品溶液配制:取实施例1方法制得的提取物5mg至50mL棕色容量瓶中,加 30mL 10 %乙腈水溶液超声溶解,冷却至室温后,继续加10 %乙腈水溶液定容。分析方法如 下:

  [0037] 色谱柱:Agilent Zorbax Extent_C18 柱(4. 6mmX 250mm,5 μ m);

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